實(shí)驗室滅菌有哪幾種方法,各有什么特點(diǎn)
實(shí)驗室對換將要求一向極高,面對實(shí)驗室中產(chǎn)生的諸多細菌,會(huì )導致實(shí)驗室有效實(shí)驗室出現偏差,那么如何消除實(shí)驗室的細菌,今天就來(lái)學(xué)習實(shí)驗室滅菌的有有效方法,我們看看有哪幾種。
1、高壓蒸汽滅菌
為濕熱滅菌方法的一種。是微生物培養中最重要的滅菌方法。這種滅菌方法是基于水在煮沸時(shí)所形成的蒸汽不能擴散到外面去,而聚集在密封的容器中,在密閉的情況下,隨著(zhù)水的煮沸,蒸汽壓力升高,溫度也相應增高。(PV=nRT)高壓蒸汽是最有效的滅菌法,能迅速地達到完全徹底滅菌。一般在15磅/英寸2壓力下(121.6℃),15~30分鐘,所有微生物包括芽孢在內都可殺死。它適用于對一般培養基和玻璃器皿的滅菌。
進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的容器是高壓蒸汽滅菌鍋。高壓蒸汽滅菌鍋是一個(gè)能耐壓又可以密閉的金屬鍋,有立式與臥式兩種。
可以用電熱、煤氣、蒸汽等。鍋上裝有壓力表,有的還裝有溫度計,能及時(shí)了解鍋內壓力及溫度。鍋上還設有排氣口,其作用是在密閉之前,利用蒸汽將鍋內的冷空氣排凈,另外還裝有安全活門(mén),如果壓力超過(guò)一定限度,活門(mén)即可自動(dòng)打開(kāi),放出過(guò)多的蒸汽。
2、干熱滅菌
微生物培養中常用的干熱滅菌是指熱空氣滅菌。一般在電烘箱中進(jìn)行。干熱滅菌所需溫度較濕熱滅菌高,時(shí)間也較濕熱滅菌長(cháng)。這是因為蛋白質(zhì)在干燥無(wú)水的情況下不容易凝固。一般須在160℃左右保持恒溫3~4小時(shí),方能達到滅菌的目的。干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌,凡帶有橡膠的物品和培養基,都不能進(jìn)行干熱滅菌。
3、間歇滅菌
各種微生物的營(yíng)養體在100℃溫度下半小時(shí)即可被殺死。而其芽孢和孢子在這種條件下卻不會(huì )失去生活力。間歇滅菌就是根據這一原理進(jìn)行的。間歇滅菌的方法是用100℃、30分鐘殺死培養基內雜菌的營(yíng)養體,然后將這種含有芽孢和孢子的培養基在溫箱內或室溫下放置24小時(shí),使芽孢和孢子萌發(fā)成為營(yíng)養體。這時(shí)再以100℃處理半小時(shí),再放置24小時(shí)。如此連續滅菌3次,即可達到完全滅菌的目的。間歇滅菌通常在流動(dòng)蒸汽的滅菌鍋中進(jìn)行,也可用普通鋁鍋代替。這種滅菌方法多用于明膠、牛乳等物質(zhì)的滅菌,這類(lèi)物質(zhì)在100℃以上的溫度下處理較長(cháng)時(shí)間,會(huì )被破壞,而用間歇滅菌法就既起到了殺菌作用,又使被處理的物質(zhì)免遭破壞。
4、紫外線(xiàn)滅菌
紫外線(xiàn)殺菌力最強的是波長(cháng)2650~2660?(10-1nm)的部分。無(wú)菌室緩沖間和接種箱常用紫外線(xiàn)燈作空氣滅菌。無(wú)菌室和緩沖間的照射時(shí)間為20~50分鐘(視房間大小而定),接種箱照射10~15分鐘即可。為了加強紫外線(xiàn)滅菌的效果,在照射前,可在無(wú)菌室、緩沖間或接種箱內噴灑5%石炭酸,以使空氣中附著(zhù)有微生物的塵埃降落,同時(shí)也可以殺死一部分微生物。無(wú)菌室的工作臺的臺面和椅子,可用2~3%的來(lái)蘇兒擦洗。然后再照射紫外線(xiàn)。由于紫外線(xiàn)對人體有傷害作用,所以人不要直視正在照射的紫外線(xiàn)燈,也不要在照射情況下進(jìn)行工作。
滅菌后,為了檢驗紫外線(xiàn)的滅菌效果,可以在無(wú)菌室、緩沖間或接種箱內放一套盛有培養基的培養皿,將皿蓋打開(kāi)5~10分鐘,蓋好后,放入溫箱中培養。如果只有一、二個(gè)菌落,可認為滅菌效果良好。如雜菌叢生。則需延長(cháng)照射時(shí)間或同時(shí)加強其它滅菌措施。
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